ABSTRACT
We hypothesize that the Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP) assay that follows the reaction of Fe3+-TPTZ at 593 nm underestimates the antioxidant capacity of fruits, since the standardized time of the reaction (4 min) is not enough to titrate all the reducing compounds available. We measured FRAP, total phenolics and anthocyanins content in a variety of Chilean berry fruits (blueberries, blackberries, raspberries and strawberries) and apples (cv. Fuji, Granny Smith, Pink Lady, Red Delicious and Royal Gala). Taking into account the dependence of FRAP on the time course of the reaction, we propose to measure FRAP indexes after 1 min (FRAP-1), 30 min (FRAP-30) and 120 min (FRAP-120) of incubation. Most fruit extracts showed significant correlations between the antioxidant capacity and the incubation time, although in some cases the FRAP indexes did not correlate with the total phenolics and/or anthocyanins content. In fact, in apples and berries the correlation between anthocyanins content and FRAP indexes decreased with the incubation time. It is concluded that the fruit extracts analyzed require an incubation period higher than the established in the original experimental protocol to reach the equilibrium, due to the presence of a complex mixture of antioxidant compounds. In addition, a kinetic profile should be realized in each sample studied to establish the most suitable incubation period to titrate all the reactive antioxidant species.
Se plantea que el ensayo de la capacidad antioxidante de frutas, medido según el poder reductor de hierro (FRAP), que sigue la reacción de Fe3+-TPTZ a 593 nm, subestima la capacidad antioxidante, debido a que el tiempo de reacción (4 min) no sería suficiente para que reaccionen todos los compuestos reductores disponibles en las muestras. Se analizó la capacidad antioxidante FRAP, el contenido de fenoles y de antocianinas en diversos berries (arándano, mora, frambuesa y frutilla) y manzanas (cv. Fuji, Granny Smith, Pink Lady, Red Delicious y Royal Gala). Tomando en cuenta la dependencia del tiempo de incubación en el valor FRAP, se propone medir los índices FRAP después de 1 min (FRAP-1), 30 min (FRAP-30) y 120 min (FRAP-120). Diversos extractos de las frutas analizadas mostraron una correlación significativa entre la capacidad antioxidante y el tiempo de incubación; sin embargo, en algunos casos los índices FRAP no se correlacionaron con el contenido de fenoles totales y/o antocianinas. En efecto, en manzanas y berries la correlación entre el contenido de antocianinas e índices FRAP disminuyó con el tiempo de incubación. Se concluye que los extractos analizados requieren un tiempo de incubación mayor al que establece el protocolo analítico original para alcanzar el equilibrio, debido a la presencia de una compleja mezcla de compuestos antioxidantes. Además, el perfil cinético de cada muestra debería ser estudiado para establecer el periodo de incubación más adecuado para titular todas las especies antioxidantes reactivas.
Subject(s)
Antioxidants/analysis , Ferric Compounds/analysis , Fruit/chemistry , Malus/chemistry , Anthocyanins/analysis , Chile , Oxidation-Reduction , Phenols/analysis , Time FactorsABSTRACT
The antioxidant effect of 5-Aminosalicylic acid (5-ASA) on copper-mediated LDL oxidation was followed either by the emitted chemiluminiscence (CL) or by UV-vis spectroscopy. 5-ASA addition extends the lag phase in a concentration-dependent manner without changes in the rate of the process in the autoaccelerated phase. The antioxidant behavior of 5-ASA was very similar to that of Trolox, a very efficient water soluble antioxidant. The copper-binding capacity of 5-ASA was evaluated by UV-visible spectroscopy. The addition of copper to a 5-ASA solution increases the absorbance at 332 nm and generates a new band at 298 nm. These changes in the UV-vis spectra indicate formation of a complex between 5-ASA and copper. However, LDL protection by 5-ASA is unrelated to its copper chelating capacity.